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氟碳漆则内参照物又称为竞争性参照物

作者 Admin 浏览 发布时间 15/01/19

    氟碳漆内参照物若与待检样本共用同一对引物,两模板的扩增存在竞争性,则内参照物又称为竞争性参照物,这种条件下进行的定量PCR又称竞争性定量PCR。而后者,内参照物与待检样本并不共用同一对引物,这种定量PCR因其不存在竞争性故属非竞争性定量PCR;外参照物独立于待检样本定量PCR扩增系统,常采用系列稀释的已知含量标准品。

    在非竞争性定量PCR中,通过外参照物单独扩增建立标准品初始含量与最终产物间的标准曲线,用于未知样本的类推定量。APPCR(arbitrarilyprimedPCR)APPCR技术是在对所扩增的基因序列一无所知的情况下随意设计或选择一个非特异性引物,在PCR反应体系中,首先使引物与模板DNA中许多序列通过错配而复性。在理论上并不一定要求整个引物都与模板复性,而只要引物的一部分特别是3’端有34bp与模板互补复性即可使引物延伸。

    如果在两条单链上相距一定距离有反向复性引物存在,则可经TaqDNA聚合酶的作用使引物延伸而发生DNA片段的扩增,经1至数轮不严格条件下的PCR循环后,再于严格条件下进行扩增。扩增的产物经DNA测序凝胶电泳分离后,经过放射自显影或荧光显示即可得到DNA指纹图,通过对不同来源基因指纹图的比较,即可反映出待分析基因组的特征。